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TCA

提取液：80%甲醇/20%水(置于干冰上冷冻！！！)

  1. 以六孔板细胞为例，置于干冰上！！！用冰PBS洗两次，加入提取液（80%甲醇/20%水）500μL/孔，用细胞刮收细胞至2ml Eppendorf管里。（PBS洗最好在干冰上，不方便操作也可以在hood里快速用冷PBS洗完，然后一定要放在干冰上加遇冷提取液；加入遇冷提取液后可以就在hood里轻晃一下孔板然后在干冰上刮细胞，或者加入遇冷提取液后放在干冰上拿出细胞房再刮细胞。）
  2. Vortex涡旋混合1 min。
  3. 室温振荡20 min。
  4. 将样品置于-20℃冷冻柜中保存60 min。
  5. 在4℃下将样品以18407xg离心10 min。【我们的小4度离心机最大17000g，10min】
  6. 将上清液转移至1.5mL离心管中【用普伦的无酶的1.5ep管】，取出5ul留做BCA，用三楼离心浓缩装置进行浓缩大约2h【参数设定：不加热(NO)，手动开启，1-2h看一次】。（六孔板浓缩后看不到太多，6cmDISH和10cmDISH浓缩后可以看到很多白色物质）
  7. 用50μL 50%乙睛/50%水 复溶样品，短暂的涡旋混合，在4℃下放置10 min，随后在4℃下以18407xg离心10 min。用移液器将样品转移至进样瓶中立即分析(TSQ)，或存-80℃。