Preparation of istd of lipidomics

注意事项 (适用于每个环节，keep in mind)

1. 要使用汉密尔顿注射器添加溶剂，注射器里不能有气泡，针头不能被污染
2. 每次从-80℃拿出来都要超声5分钟
3. Lyso PA的溶剂是C/M/W 80:20:2
4. 专门的washing，吸完标品wash3次，空打几次，吸下一个标品时先浸润几次

Standard stock solutions

不需要戴手套
称量前，先将标准品回温到室温并持续几分钟

1. 使天平气泡处于中心
2. 将棕色小瓶和盖子标记好名称, 上天平去皮
3. 用特殊的细长的微量药匙移动标准品, 1 ~ 2mg，读取三次示数取平均值, 标记在瓶子上
4. 根据分子量计算到5mM理论上需要的氯仿的量
5. 以下操作在冰上进行
6. 氯仿必须新鲜准备在合适的容器里
7. 迅速推出溶剂到瓶子中, 含磷的, 实际添加的溶剂的量只能低于理论值, 不含磷的, 精准添加理论的溶剂的量, 务必记录下来这些值
8. 用胶带保护标记
9. 用封口膜包住瓶口，储存到-80℃

磷的校准

磷的标定
(因为都准备做5mM，标品量应该都加2μl，这样落在标曲中间)
CL含有两个磷酸基团, 加2μl稍稍超过标曲, 可以接受
根据实验测得的浓度和标品剩余的总体积，计算到5mM还需要添加的溶剂的量
准备新鲜的溶剂将标准品稀释到5mM
用封口膜包住瓶口，储存到-80℃

Mix的配置

MIX成分参照Avanti 330707
考虑到实验设计，一组STDMIX应当足够24个样品使用，设置每个样品中加入的STDMIX为20μl，考虑到体积损失，一组STDMIX应为500μl
根据标准品stock浓度，计算做一组STDMIX需要取用的stock的体积a
用各个标准品总体积除以各自的a，找到最小值，意味着，你这次可以配置多少组standard mix
取一个适当小一点的值X，意味着你这次要配置X组STDMIX
计算配置X组STDMIX所需的各个标准品的体积
准备就绪后，在冰上，依次添加标准品至合适的容器中
在氮气下吹干
用X×100μl体积C/M复溶，超声5分钟
分装到X个琥珀色小瓶中
真空涡旋？？？
用封口膜包住瓶口，储存到-80℃
当需要取用时，1个standard mix用25×20μl体积C/M复溶，足够24个sample
续购即将用完的标准品